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技術文章
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外泌體通過分子信息傳遞扮演著重要的角色
2022-01-07
外泌體作為疾病診斷標志物的潛在應用依賴于基于外泌體的藥物遞送系統的技術突破，要將其用于臨床治療，外泌體的大規模工業化生產面臨很大的挑戰。外泌體（exosome）是細胞分泌囊泡（extracellularvesicles）的一種亞型，存在于生物體液中，并參與多種生理和病理過程。外泌體被認為是細胞間通信的一種新機制，允許細胞交換蛋白質、脂質和遺傳物質。過去，細胞分泌的外泌體一度被認為只是參與廢物排泄；現在，隨著高通量蛋白質組學和基因組學的發展，外泌體被廣泛認為是生物體內細胞間短距...
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介紹細胞凋亡形態學的幾種檢測方法
2021-11-28
細胞凋亡與壞死是兩種*不同的細胞凋亡形式，根據死亡細胞在形態學、生物化學和分子生物學上的差別，可以將二者區別開來。細胞凋亡的檢測方法有很多，下面介紹幾種常用的測定方法。根據凋亡細胞固有的形態特征，人們已經設計了許多不同的細胞凋亡形態學檢測方法。1、光學顯微鏡和倒置顯微鏡（1）未染色細胞：凋亡細胞的體積變小、變形，細胞膜完整但出現發泡現象，細胞凋亡晚期可見凋亡小體。貼壁細胞出現皺縮、變圓、脫落。（2）染色細胞：常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細胞的染色質濃縮、邊緣化，核膜裂解、...
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外泌體的提取主要包括以下幾種方式
2021-11-25
外泌體是指包含了復雜RNA和蛋白質的小膜泡(30-150nm)，現今，其特指直徑在40-100nm的盤狀囊泡。1983年，外泌體于綿羊網織紅細胞中被發現，1987年Johnstone將其命名為“exosome”。多種細胞在正常及病理狀態下均可分泌外泌體。其主要來源于細胞內溶酶體微粒內陷形成的多囊泡體，經多囊泡體外膜與細胞膜融合后釋放到胞外基質中。所有培養的細胞類型均可分泌外泌體，且外泌體天然存在于體液中，包括血液、唾液、尿液、腦脊液和乳汁中。有關他們分泌和攝取及其組成、“運載...
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蛋白酶K的配制標準及保存方法
2021-10-26
蛋白酶K廣泛應用于分子生物學,藥理學等科研方面.一種非特異性、枯草桿菌蛋白酶相關的絲氨酸蛋白酶,具有很高的比活性.一般儲存在-20°C,避光防潮密閉干燥。蛋白酶Ｋ主要應用于基因檢測中基因抽取，是檢測試劑盒生產的重要原料，蛋白酶K產品由于在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白質的能力，因而被廣泛應用于制備脈沖電泳的染色體DNA，以及去除DNA和RNA中的核酸酶。現有基因抽提及檢測試劑盒中均需配備該酶。蛋白酶K配制標準：20mg/ml蛋白酶K配制標準(proteinaseK)：將2...
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使用CCK-8要注意的事項有哪些
2021-10-25
CellCountingKit-8（簡稱CCK8）試劑可用于簡便而準確的細胞增殖和毒性分析。相信做細胞的同學對他都很熟悉，你確定你使用CCK-8試劑的方式是*正確的嗎？使用CCK-8要注意的事項有哪些：1.酚紅和血清對CCK8法的檢測不會造成干擾，可以通過扣除空白孔中本底的吸光度而消去。2.CCK8可以檢測大腸桿菌，但不能檢測酵母細胞。在細胞增殖實驗每次測定的過程中需要避免細菌污染，以免影響結果。3.當在培養箱內培養時，培養板最外一圈的孔最容易干燥揮發，由于體積不準確而增加誤...
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胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異有哪些
2021-09-26
胎牛血清（FetalBovineSerum,FBS）是在屠宰懷孕母牛的時候，通過心臟穿刺采取胎牛血獲取的血清，因其未與外界環境接觸，所以血清內IgG等免疫因子相對含量較少，適合用于免疫類細胞的培養。胎牛血清與新生牛血清在蛋白組成上的差異還是很明顯的。首先，胎牛血清總蛋白含量（g/dl）約為2%-4%,新生牛血清約為3.0%-5.0%,成牛血清則高達8%-10%.從蛋白含量上也可以初步判斷一個血清是否為胎牛或新生牛血清，蛋白含量越高說明牛齡越大，目前檢測蛋白含量是初步檢測一項重...
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常見的細胞轉染技術可分為瞬時轉染和穩定轉染
2021-08-29
細胞轉染是將外源性基因導入細胞內的一種專門技術。隨著基因與蛋白功能研究的深入，轉染目前已成為實驗室工作中經常涉及的基本方法。常規轉染技術可分為兩大類,一類是瞬時轉染,一類是穩定轉染。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞中可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其它調控元件的分析。一般來說，超螺旋質粒DNA轉染效率較高，在轉染后24-72小時內（依賴于各種不同的構建）分析結果，常常用到一些報告系統如熒光蛋白，β半乳糖苷酶等來幫...
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一文帶你了解關于細胞增殖的知識
2021-08-27
一、什么是細胞增殖細胞增殖是生物體的重要生命特征，細胞以分裂的方式進行增殖。單細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的個體。多細胞生物，以細胞分裂的方式產生新的細胞，用來補充體內衰老或死亡的細胞。二、細胞增殖的意義和方式意義：細胞增殖是生活細胞的重要生理功能之一，是生物體的重要生命特征。細胞的增殖是生物體生長、發育、繁殖以及遺傳的基礎。方式：真核生物的分裂依據過程不同有三種方式，有有絲分裂，無絲分裂，減數分裂。其中有絲分裂是人、動物、植物、真菌等一切真核生物中的一種zui為普遍的分...
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