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產(chǎn)品中心細(xì)胞生物學(xué)細(xì)胞染色AC15L016小麥胚芽凝集素，AF647標(biāo)記
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
小麥胚芽凝集素，AF647標(biāo)記（下文簡(jiǎn)稱(chēng)“AF647 WGA"）， 是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結(jié)合的凝集素，可能是明亮和綠色熒光中最亮的WGA綴合物。它是目前研究多、應(yīng)用廣泛的一類(lèi)凝集素。
產(chǎn)品分類(lèi)
相關(guān)文章
| 品牌 | Life-iLab/李記生物 | 貨號(hào) | AC15L016 |
|---|---|---|---|
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),綜合 |
產(chǎn)品描述
小麥胚芽凝集素， AF647標(biāo)記（下文簡(jiǎn)稱(chēng)“AF647 WGA "）， 是一種與N-乙酰-D-葡萄糖胺和唾液酸結(jié)合的凝集素，可能是明亮和綠色熒光中最亮的WGA綴合物。它是目前研究多、應(yīng)用廣泛的一類(lèi)凝集素。由于WGA與糖綴合物結(jié)合，其衍生物和綴合物被廣泛用于標(biāo)記細(xì)胞膜和纖維化瘢痕組織，用于熒光成像和分析。WGA的糖結(jié)合特異性與β-1,4-GlcNAc-連接殘基的序列，即幾丁質(zhì)酶有關(guān)。每個(gè)單體包含兩個(gè)相同的非相互作用的結(jié)合位點(diǎn)，它們與3或4β-1,4-GlcNAc單元互補(bǔ)。在所檢測(cè)的單糖中，只有GlcNAc與WGA結(jié)合。甘露聚糖不結(jié)合，而GalNAc只能弱結(jié)合。WGA與含有Galβ（1--4）GlcNAcβ（1--3）重復(fù)序列（即聚乳糖胺型聚糖）的大寡糖中的內(nèi)部GlcNAc殘基具有高親和力結(jié)合。N-乙酰神經(jīng)氨酸只參與與WGA的低親和力相互作用。WGA顯示了復(fù)雜的糖類(lèi)特異性模式，可用于復(fù)雜碳水化合物的結(jié)構(gòu)分析。
技術(shù)資料
Ex (nm)： | 656 | Em (nm)： | 670 |
分子量： | N/A | 溶劑： | Water |
訂購(gòu)信息
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
小麥胚芽凝集素，AF647標(biāo)記 | AC15L016 | 1mg |
運(yùn)輸與保存
藍(lán)冰運(yùn)輸。-20℃避光防潮保存，有效期12個(gè)月。
適用儀器
熒光顯微鏡 | |
激發(fā)： | Cy5濾波片 |
發(fā)射： | Cy5濾波片 |
推薦孔板： | 黑色透明 |
使用方法
溶液配制
1. AF647 WGA儲(chǔ)備溶液（200X）配制
將 500 µL ddH2O 添加到粉末小瓶中，制成 2 mg/mL 的儲(chǔ)備溶液?！咀ⅰ浚褐匦屡渲频膬?chǔ)備溶液可在 4℃ 下短期儲(chǔ)存，或在 -20℃ 下長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
2. AF647 WGA工作溶液（1X）配制
將 5 μL 200X WGA 儲(chǔ)備溶液添加到 1 mL HHBS 緩沖液中。【注】：不同細(xì)胞系的優(yōu)化染色濃度可能不同。活細(xì)胞的推薦起始濃度為 5-10 µg/mL。
操作步驟
1. 活細(xì)胞染色
(1) 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。
(2) 添加 100 µL AF647 WGA 工作溶液。
(3) 將細(xì)胞與AF647 WGA 工作溶液在 37°C 下孵育 10-30 min。
(4) 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。
(5) 使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。
2. 固定細(xì)胞染色
(1) 在PBS中使用4％的甲醛固定細(xì)胞?！咀ⅰ浚簩?duì)于固定細(xì)胞膜染色，建議在沒(méi)有透化步驟的情況下進(jìn)行染色。固定后透化步驟會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)區(qū)室染色，如高爾基體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng) (ER) 結(jié)構(gòu)染色。
(2) 添加 100 µL AF647 WGA 工作溶液。
(3) 在室溫下用AF647 WGA 工作溶液孵育細(xì)胞 10-30 min。
(4) 用 HHBS 緩沖液清洗細(xì)胞兩次。
(5) 使用 FITC 濾光片組在熒光顯微鏡上成像細(xì)胞。
圖示
圖 1. 使用AF647 WGA 以 5 µg/mL的濃度在活細(xì)胞（Hela細(xì)胞） 染色 30 min，然后用 Hoechst 33342（Cat# AC12L021）染色。最后使用帶Cy5和DAPI 濾光片組的熒光顯微鏡成像。
注意事項(xiàng)
1. 本產(chǎn)品僅限于科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用，不得用于臨床診斷、治療等領(lǐng)域。
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